ン)を用いた．図3のように800 nJ/pulseのフェムト秒レーザーパルスを100倍対物レンズ(NA 1.25)と通じて1%アガロースゲル表面に20箇所集光し，その後に2 μMのFITC-デキストラン溶液を滴下した．共焦点蛍光観察には4倍対物レンズ(NA 0.16)を用いて行った．蛍光分子の励起には波長488 nmの連続発振DPSSレーザー(50μW)を用いた．図3フェムト秒レーザー照射に伴って変化するアガロースゲル中のFITC-デキストラン透過性評価の概要図2(a)フェムト秒レーザー集光点におけるアガロースゲルのフォースカーブ測定の概要,(b)40 μmのガラスビーズを接着したAFMカンチレバー,(c)フォースカーブ測定の概要．カンチレバーを試料へ押し込み，試料からの反力によるカンチレバーのたわみ量をAFMの光てこを用いて計測する．表1AFMカンチレバーの代表的な仕様AFM probe図4フェムト秒レーザー照射前後におけるアガロースゲル表面のヤング率マッピング．像の1辺は10 μm.３．研究成果■・■フェムト秒レーザー照射に伴うアガロースおよびコラーゲンゲルのヤング率変化ひずみ曲線（フォースカーブ）を測定し，ヘルツの接触理論に基づいて得られたフォースカーブをフィッティングすることでヤング率Eの値を算出した．ここでPは試料からの反力，νはポアソン比，Rは先端半径，σは試料の押し込み量である．用いたカンチレバー（Nanosensors, TL-CONT）は平均的に表1に示すような特性を有しており，柔らかいハイドロゲルへカンチレバー先端が突き刺さることを防ぐためにチップレスのカンチレバー先端に直径40 μmのガラスビーズを接着剤で接着した．ハイドロゲルとしてはガラスベースディッシュ底面のガラス部に作製した厚さ数百マイクロメートルの5%アガロースゲル及び3%コラーゲンゲルを使用した． ・ ハイドロゲルの分子透過性の評価ハイドロゲルの分子透過性は，その上に滴下した蛍光性分子の3次元空間分布をレーザー走査型共焦点蛍光顕微鏡(Olympus, FV-300)で観測することで評価した．分子には蛍光性分子であるフルオロセイン(λex=490 nm, λem=520 nm)を標識した2 MDaの糖鎖高分子(FITC-デキストラ250 nJ/pulseのフェムト秒レーザーパルスを5%のアガロースゲル表面に照射し，レーザー照射前後で，集光点を中心とした10x 10μmの領域のフォースマッピングを実施した代表的な結果を図4に示す．得られたヤング率分布を比較した結果，レーザー集光点で特に大きなヤング率の増減は観測されなかった．マッピングを行った100点の平ShapeLength (μm)Spring constant (N/m)Frequency (kHz)Width (μm)Thickness (μm)MaterialTL-CONTBeam4500.213502Silicon− 422 −𝑃𝑃=43𝐸𝐸𝑅𝑅12(1−𝑣𝑣2)𝛿𝛿32
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